液相色譜定量分析原理及相關(guān)知識點(diǎn)

液相色譜定量分析原理

在定性的基礎上定量,需有純物質(zhì)作為標準物

液相色譜定量是相對定量的方法:即由已知量的純標樣推算混合物中被測物的量

定量的依據是:

被測組分的量與響應值(峰高或峰面積)成正比

由已知量的標樣可求得定量校正因子

定量校正因子:是定量計算公式中的比例常數,其物理意義是單位響應值(峰面積)所代表的被測組分的量

測定未知組分的響應值,通過(guò)定量校正因子即可求得其含量

液相色譜定量分析的步驟

1、選擇一個(gè)適合定量分析的色譜方法：

確認被檢測組分峰,并達到分離度(R)大于1.5

確定被測組分色譜峰的一致性(純度)

確定方法的檢測限及定量限;靈敏度及線(xiàn)性范圍

2、用不同濃度的標準樣品建立校正曲線(xiàn)

3、考查定量方法的準確度及精密度

4、用相應的色譜管理軟件實(shí)施樣品采集,數據處理及報告結果

鑒別需定量的色譜峰(定性)

定性鑒別每個(gè)要定量的色譜峰

先用標樣確定欲定量之色譜峰的保留時(shí)間(Rt)，通過(guò)比較保留時(shí)間,找到未知樣中各色譜峰所對應的組份，色譜定性是用與標樣比較保留時(shí)間的方法，判據并不充分

進(jìn)一步的確認(定性)

1、標準加入法

2、同時(shí)用其它方法：其它色譜方法(改變機理,如:用不同的色譜柱) 、其它檢測器 （PDA：光譜圖比較、譜庫檢索；MS：質(zhì)譜圖解析、譜庫檢索）

3、其它儀器方法

確認定量峰的一致性

確認色譜峰的一致性(純度)

保證每個(gè)色譜峰下只有一個(gè)被測的組份

檢查是否有共流出的物質(zhì)（雜質(zhì)）干擾

色譜峰一致性(純度)確認的方法

用光電二極管矩陣(PDA)檢測器比較光譜圖

峰純度鑒定

2996的純度角理論